期刊简介

本刊为卫生部主管、中华预防医学会主办的综合性预防医学学术期刊,国内外公开发行,本刊服务于广大会员和从事预防医学卫生科技人员,以促进国内外预防医学学术交流和医学发展,提高全民族的健康水平。

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  • 杂志名称:中国预防医学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中华预防医学会
  • 国际刊号:1009-6639
  • 国内刊号:11-4529/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中华预防医学系列期刊优秀编辑奖期刊收录:统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏
中国预防医学杂志2013年第06期

致农民肺嗜热吸水链霉菌cDNA文库的构建及体外表达

凌媛;王玲玲;刘朔;马列;王群;张丽娇;何晓雨;赵明静;王笑歌

关键词:农民肺, 嗜热吸水链霉菌, cDNA文库, 抗原, EST
摘要:目的 构建致农民肺嗜热吸水链霉菌cDNA文库并进行EST测序,通过生物信息学软件分析EST序列同源性及生物学功能,筛选重组阳性基因克隆进行体外表达.方法 利用SMART方法构建致农民肺嗜热吸水链霉菌的cDNA文库,随机挑选重组阳性克隆进行EST测序.挑选有关目的基因连接入pET-28a载体并转化大肠埃希菌BL2 (DE3),IPTG诱导体外表达.结果 该文库的重组率为96.3%,是一个较高质量的文库.从文库中随即挑选的1 020个重组阳性的克隆,获得978个有义序列,平均长度为495 bp,含有347个单一基因,同源性比较发现部分序列与猪胸膜肺炎放线菌外膜蛋白(omla),转铁蛋白B(TbpB)具有较高的同源性,分别为51%和42%.将重组阳性的基因克隆至载体中,IPTG诱导得到表达产物的相对分子质量分别为63×10 3和30× 103.结论 所构建的致农民肺嗜热吸水链霉菌cDNA文库包含全部EST序列,可能包含嗜热吸水链霉菌相关疾病巨大部分毒力分子,这些数据的积累将有助于农民肺特异性毒力分子的进一步筛选,同时为研究农民肺的发病机制奠定基础,如果能准确筛选出相关毒力基因,将为农民肺血清学诊断以及特异性疫苗的研发奠定基础.